HT-29人結(jié)腸癌細胞

規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點：細胞代數(shù)為2-4代
貨期：1-2周
運輸方式：快遞運輸或送貨上門
售后：收到細胞后，如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，請及時聯(lián)系銷售人員，我們將盡快為您解決。

凍存液成分：10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液

細胞質(zhì)檢情況：不含細菌、真菌、支原體等微生物污染

傳代建議：1:2~1:3傳代，2~3天換液1次

特別提醒：簽收細胞后，如細胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題，煩請當天盡快聯(lián)系，以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請務(wù)必重視。

HT-29人結(jié)腸癌細胞

復(fù)蘇

1. 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。

2. 把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來），1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

3. 把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動，使培養(yǎng)皿中的細胞均勻分布。

4. 標好細胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細胞貼壁后換培養(yǎng)基。

5. 3天換一次培養(yǎng)基。

二、 細胞傳代

1. 培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。

2. 把原有培養(yǎng)基吸掉。

3. 加適當?shù)囊鹊鞍酌福芨采w細胞就行），消化1-2分鐘。

4. 細胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。

5. 用移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。

6. 把細胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。

7. 倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細胞都吹起來。

8. 根據(jù)細胞種類把細胞傳到幾個培養(yǎng)皿中。一般，癌細胞分5個，正常細胞傳3個。繼續(xù)培養(yǎng)。

三、細胞凍存

把細胞消化下來并離心（同上）。用配好的凍存液把細胞懸浮起來，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細胞種類，凍存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃過夜，然后放到液氮灌中保存。

凍存液的配制： 70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

要注意的就是無菌操作！

細胞培養(yǎng)常見問題及解決方法